Etablering av forhold for stabil antistoffproduksjon fra EBV-transformerte humane B-celler

Abstract

Føtal neonatal alloimmun trombocytopeni (FNAIT) er en alvorlig tilstand som kan oppstå under graviditeten der morens immunforsvar angriper fosterets trombocytter. I arbeidet med å forstå den cellulære responsen knyttet til blodplatereaktive antistoffer er det gjort forsøk på å hente ut spesifikke B-celler fra alloimmuniserte gravide. Utfordringen er at de isolerte B-cellene er ustabile; de dør, slutter å vokse eller slutter å produsere antistoffer. I dette laboratoriearbeidet ble det gjort forsøk på å etablere forhold for stabil antistoff- produksjon fra IgG+ B-celler, dette ved hjelp av EBV-transformasjon og inkubering med feederceller i kultur. Vi hadde suksess med isolering av IgG+ B-celler og EBV-transformasjonen var vellykket. Cellene produserte spesifikke antistoffer med en frekvens som forventet for sirkulerende antigen-spesifikke memory B-celler. I våre eksperimenter fant vi at feedercellene økte effektiviteten av antistoffproduksjon og ga økt overlevelse av de IgG+ cellene i kultur. Resultatene kan brukes i videre forskning for å utvikle profylaktisk behandling for FNAIT. Spesielt kan metoden benyttes for utvikling av monoklonale B-cellelinjer spesifikk for human plate antigen (HPA).