Studier av Hjerte- og skjelettmuskelbetennelse (HSMB) i Atlantisk laks (Salmo salar L.). Effekter av Infeksiøs pankreasnekrose virus (IPNV) og vaksinasjon på utviklingen av HSMB in vivo, og etablering av primærkultur av hjerteceller for dyrking av Piscine reovirus (PRV) in vitro.

Abstract

Hjerte- og skjelettmuskelbetennelse (HSMB) og infeksiøs pankreasnekrose (IPN) er utbredte sykdommer i norsk lakseoppdrett. IPN er forårsaket av Infeksiøs pankreasnekrose virus (IPNV) og HSMB er assosiert med tilstedeværelse av Piscine reovirus (PRV). Utbrudd av HSMB i oppdrettslaks er ofte observert like i etterkant av et IPN utbrudd, men hvordan en IPNV infeksjon påvirker utviklingen av HSMB er ikke kjent. I første del av oppgaven ble det gjennomført et smitteforsøk med Atlantisk laks, hvor det ble studert hvilken effekt IPNV og vaksinasjon har på utviklingen av HSMB in vivo. Det ble etablert en persistent infeksjon av IPNV etter smitte i ferskvann som varte gjennom hele forsøksperioden frem til 10 uker etter overføring av fisken til sjøvann. Det ble ikke påvist signifikante forskjeller i virusinnhold mellom vaksinert og uvaksinert fisk, noe som bekrefter at vaksinering ikke forhindrer at fisken blir smittet med IPNV og blir bærere av viruset. En reaktivering av bærertilstanden ble ikke påvist etter at fisken ble overført til sjøvann. HSMB ble indusert ved smitte med PRV positivt hjertehomogenat fra HSMB syk fisk ved sjøsetting. PRV (RNA) ble påvist i fisken 3 uker etter smitte, før diagnosen HSMB ble bekreftet. Det ble påvist en større mengde PRV i vaksinert fisk i forhold til uvaksinert fisk 7 og 10 uker etter smitte, noe som kan indikere at PRV etableres lettere i vaksinert fisk. 7 uker etter smitte ble likevel HSMB diagnostisert på basis av hjertehistologisk undersøkelse i alle testede fisk og det ble ikke påvist noen patologiske forskjeller mellom vaksinert og uvaksinert fisk. En bærertilstand av IPNV så ikke ut til å påvirke hverken innhold av PRV i fisken eller utvikling av patologiske forandringer forbundet med HSMB. Dyrking av virus i cellekultur er et essensielt verktøy blant annet forproduksjon av virus til bruk i vaksiner. Det finnes godt etablerte metoder for dyrking av IPNV in vitro, men frem til i dag er dette ikke kjent for PRV. I andre del av oppgaven ble det utarbeidet en protokoll for etablering og hold av primærcellekulturer fra laksehjerter in vitro. Arbeidet som ble utført inkluderte også observasjon og beskrivelse av utviklingen til cellene gjennom flere uker i kultur. PRV ble forsøkt dyrket i disse hjertecellekulturene og i en etablert hjertecellelinje fra Stillehavslaks. Resultater fra forsøkene gav ingen sikre svar på om virus ble oppformert. Det ble imidlertid gjort interessante funn, spesielt ved forsøk med hjertecellekulturene, som må studeres videre før man eventuelt kan bekrefte eller avkrefte om cellene er egnet for dyrking av PRV.