Rollen til urokinase plasminogen aktivator reseptoren (uPAR) for uttrykk av molekyler involvert i celle adhesjon, migrasjon og invasjon

Abstract

Urokinase-type-plasminogen activator reseptor (uPAR) er funnet overuttrykt i organer som har omfattende remodulering av vevet. uPAR har flere ligander, blant annet serine proteasen urokinase plasminogen aktivator uPA, ekstracellulær matrix proteine vitronectin og integriner. uPA aktiveres ved binding til uPAR. Aktiv uPA aktiverer ved binding til uPAR og kan deretter aktivere plasmin som kan degradere en rekke eCM molekyler direkte og direkte ved å binde ECM komponenter og indirekte ved å aktivere MMPer. uPAR fungerer ikke bare som en reseptor for proteaser. Ved å binde integriner påvirker den også cellers migrasjon, adhesjon, differensiering og proliferasjon gjennom intracellulær signalering. Fordi uPAR har disse egenskapene er den vist å være en viktig komponent ved invasiv kreft og metastasering i en rekke kreftformer. I denne oppgaven var målet å studere om overuttrykk av uPAR i oralekreftceller påvirket uttrykket i utvalgte gener og proteiner som er involvert i celle adhesjon, migrasjon og invasjon. Det ble først verifisert at klonene AT-84-EV1, AT84-EV3, AT-84-EV4, AT-84-uPARmedium og AT-84 uPARhøy har ulik mengde uPAR på proteinnivå ved Western blotting og på RNA nivå ved RT- qPCR. Deretter ble RT-qPCR brukt for å avdekke om overutrykk av uPAR i klonene hadde påvirket uttrykket av et utvalg av gener. I tillegg ble det gjort en screen ved bruk av en RT-qPCR basert metode kalt RT2-profiler der mRNA nivået til 84 gener knyttet til kreft ble analysert. Resultatet viser at overuttrykk av uPAR og E-cadherin resulterte i en nedregulering av MMP-9, mens nivåene av uPA, PAI-1,S100A4 og MMP-2 ikke så ut til å være endret. Nedreguleringen av E-cadherin ble også verifisert på proteinnivå ved Westernblot.