Kan Staphylococcus aureus proteinet SdrD binde til humante Desmoglein 1?

Abstract

Staphylococcus aureus (S. aureus) evne til å kolonisere humane neseborer er en viktig forutsetning for sykdommer, spesielt hudsykdommer. S.aureus koloniserer verten ved å binde til overflatekomponenter. Bakterien benytter adhesiner kalt mikrobielle overflate komponenter som gjenkjenner adhesive matriks molekyler (MSCRAMM) til å binde til disse. Noen av de humane interaksjons partnere til MSCRAMM er kjent, mens noen er fortsatt ukjent. I denne oppgaven, har vi sett på molekylære interaksjonen mellom et bestemt MSCRAMM, nemlig Serine-aspartat repeterende protein D (SdrD) på overflaten av S.aureus og desmoglein 1 (Dsg 1) på vertscellens overflate. Dsg 1 består av en ekstracellulær del (ekstra), en transmembran del og en intracellulær del (intra). Genene for hver del ble klonet inn i eukaryot ekspresjonsvektor. Dsg 1 ekstra, Dsg 1 intra og SdrD med forskjellige tagger (His- og GST-tag) ble isolert fra prokaryote ekspresjonsvektor. De rensede proteinene ble brukt i co-immunopresipitering (co-IP) fra eukaryot cellelysat og i testrør (in vitro). Flere co-IP forsøk ble utført, men de var inkonklusive og i fremtiden må man optimalisere metodene eller forandre metodene for å endelig bekrefte interaksjoner.